+ Bước 1 : Tách ADN nhiễm sắc thể của tế bào người (tế bào cho) và tách plasmit khỏi tế bào vi khuẩn. + Bước 2 " Cắt ADN của tế bào người và ADN plasmit ở những điểm xác định bằng cùng một loại enzym cắt restrictaza. 

+ Bước 3 :Nối đoạn ADN của tế bào cho và ADN plasmit nhờ enzym nối ligaza) tạo nên ADN tái tổ hợp.

+ Bước 4:chuyển ADN tái tổ hợp vào tế bào E. coli tạo điều kiện để gen đã ghép được biểu hiện tổng hợp insulin

Các bước tiến hành:

- Khâu 1: Tách ADN chứa gen mã hóa hoocmon insulin trong NST của tế bào người và tách phân tử ADN dùng làm thể truyền của vi khuẩn E.coli.

- Khâu 2: Tạo ADN tái tổ hợp hay ADN lai.

+ Sử dụng enzim cắt chuyên biệt để cắt lấy ADN chứa gen mã hóa hoocmon insulin từ ADN đã được tách ra của tế bào người và cắt mở vòng phân tử ADN dùng làm thể truyền của vi khuẩn E.coli ở vị trí xác định.

+ Sử dụng enzim nối để nối đoạn ADN mang gen mã hóa hoocmon insulin của tế bào người và phân tử ADN dùng làm thể truyền tại vị trí đã cắt để tạo ADN tái tổ hợp.

- Khâu 3: Chuyển ADN tái tổ hợp vào vi khuẩn E.coli và tạo điều kiện để vi khuẩn sinh trưởng và sinh sản, từ đó gen mã hóa hoocmon insulin được biểu hiện.